Kuidas kasutatakse restriktsiooniensüüme geelelektroforeesi läbiviimisel?
Kuidas kasutatakse restriktsiooniensüüme geelelektroforeesi läbiviimisel?

Video: Kuidas kasutatakse restriktsiooniensüüme geelelektroforeesi läbiviimisel?

Video: Kuidas kasutatakse restriktsiooniensüüme geelelektroforeesi läbiviimisel?
Video: Kuidas kasutatakse plokiahela süsteemi krüptoraha puhul? 2024, November
Anonim

1 vastus. DNA, RNA või plasmiidi lõikamiseks piirang saidid (nagu EcoRI, BamHI, hindIII ja BglII), et luua väiksemaid geneetilisi fragmente, mida saab eraldada ja seega iseloomustada kasutades geelelektroforees.

Samamoodi võib küsida, milline on restriktsiooniensüümide roll?

A restriktsiooniensüüm on valk, mis tunneb ära spetsiifilise lühikese nukleotiidjärjestuse ja lõikab DNA ainult selles konkreetses kohas, mis on tuntud kui piirang sait või sihtjärjestus. Elus bakterites, restriktsiooniensüümide funktsioonid kaitsta rakku sissetungivate viiruslike bakteriofaagide eest.

Lisaks, kuidas teate, millist restriktsiooniensüümi kasutada? Restriktsiooniensüümide valimisel soovite valida ensüüme, mis:

  1. Lükake sisetükki külge, kuid ärge lõigake sisetükki sisse.
  2. Asuvad soovitud asukohas teie retsipientplasmiidis (tavaliselt mitmes kloonimissaidis (MCS)), kuid ärge lõigake plasmiidi mujalt.

Lisaks sellele, kuidas kasutatakse restriktsiooniensüüme teadusuuringutes?

Laboris, restriktsiooniensüümid (või restriktsiooni endonukleaasid ) on kasutatud DNA lõikamiseks väiksemateks fragmentideks. Lõiked tehakse alati kindlates nukleotiidjärjestustes. Erinevad restriktsiooniensüümid ära tunda ja lõigata erinevaid DNA järjestusi.

Mis on geelelektroforeesi roll?

Geelelektroforees on tehnika, mida kasutatakse DNA fragmentide eraldamiseks nende suuruse järgi. DNA proovid laaditakse süvenditesse (süvenditesse) ühes otsas a geel , ja nende läbi tõmbamiseks rakendatakse elektrivoolu geel . DNA fragmendid on negatiivselt laetud, seega liiguvad nad positiivse elektroodi poole.

Soovitan: