Sinise valge ekraani teostamisel sisaldavad valged bakterikolooniad?
Sinise valge ekraani teostamisel sisaldavad valged bakterikolooniad?

Video: Sinise valge ekraani teostamisel sisaldavad valged bakterikolooniad?

Video: Sinise valge ekraani teostamisel sisaldavad valged bakterikolooniad?
Video: Gary Sinise & The Lieutenant Dan Band - "Don't Stop Til You Get Enough" "Hey Jude" 2024, Detsember
Anonim

Vastupidi, valged kolooniad ei suuda X-Gali metaboliseerida, et toota sinine värvi, sest nad ei tooda funktsionaalset β-galaktosidaasi pärast sisestatud DNA kandva plasmiidi vastuvõtmist ja lacZ α geeni katkestamist. Need valged kolooniad sisaldavad rekombinantne bakterid ja tuleks valida (joonis 1).

Kas sel viisil sisaldavad kõik valged ja sinised kolooniad plasmiidi?

The sinised kolooniad sisaldavad “Ise” reliigeerus plasmiidid seda teha ei sisalda DNA inserte, mis katkestaksid lac Z geeni. Valged kolooniad koosnevad bakteritest, mis kannavad plasmiidid millel on DNA inserdi fragmendid, mis katkestavad lac Z geeni. Valik tehakse ampitsilliiniga sisaldavad keskmine.

Samuti, mis on sinivalge sõeluuringu eesmärk? The sinine – valge ekraan on a sõelumine meetod, mis võimaldab rekombinantsete bakterite kiiret ja mugavat tuvastamist vektoripõhistes molekulaarsetes kloonimiskatsetes. Huvipakkuv DNA ligeeritakse vektoriks.

Seda arvestades, mis on sinivalgete kolooniate sõeluuring?

The sinine - valge ekraan on sõelumine meetod, mis võimaldab tuvastada edukaid ligeerimisi vektoripõhises geenikloonimises. Huvipakkuv DNA ligeeritakse vektoriks. Kui ligeerimine õnnestus, siis bakteriaalne koloonia saab valge ; kui ei, siis koloonia saab sinine.

Miks on mõned kolooniad sinised ja teised valged?

Mis tahes koloonia plasmiidi sisaldav (ja seega ka toimiv β-galaktosidaasi geen) muutub sinine , β-galaktosidaasi aktiivsuse tulemus. Seda nimetatakse α-komplementaarsuseks. Sisend katkestas β-galaktosidaasi geeni ja seetõttu ka need kolooniad jääda valge.

Soovitan: